用于菌群结构谱或宏基因组测序分析的人类阴道微生物采样方法

一、志愿者筛选，排除以下志愿者

1. 有尿失禁者；
2. 子宫切除者；
3. 治疗过中毒性休克综合征者；
4. 5年前，患过宫颈或阴道非典型性增生者；

5. 两年前，被诊断有湿疣或人类乳头状瘤病毒（HPV）者；
6. 2个月前有患过念珠菌病，尿路感染或活跃性病（特别是衣原体、淋病、梅毒、生殖器疱疹、滴虫病）者；

7. 另外，记录阴道检查结果及 pH 检测结果，并且标本采集前，标本采集前 24-48h 禁欲、禁盆浴、禁阴道灌洗及局部上药，搜集月经期时间。

二、采样方法

1. 在无菌拭子管管盖和管壁上都写上样品名称，注意，样品名称只能用英文字母或阿拉伯数字或两者的组合，而且字符数不小于3且不大于9；

2. 常规无菌操作消毒外阴或尿道口，用扩阴器扩张阴道；

3. 用无菌棉拭子拭取宫颈口或宫颈后穹窿的分泌物，不可碰及阴道壁，圆周滚动 5 次，放入无菌拭子管中（可不添加缓冲液），迅速放置在冰上或者直接存放在-80 摄氏度冰箱中备用。

三、人类阴道中常见菌群

主要的常住菌有乳杆菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、棱状杆菌、粪链球菌等。主要的过路菌有金黄色葡萄球菌、肠杆菌、丙酸杆菌、消化链球菌、韦荣球菌等。健康妇女阴道分泌物中，厌氧菌与需氧菌的比例为 5:1，活菌数为10²-10⁹/ml，菌数可达 8x 10⁷/ml，其中常住的真菌是假丝酵母菌；阴道毛滴虫属于过路原虫；常分离出疱疹病毒-2 型（HSV-2）和巨细胞病毒等。在正常阴道微生物群中，95%为乳酸杆菌。乳酸杆菌是妇女阴道内正常微生物群的优势菌，对阴道微生态平衡有明显的调节作用。

四、送样方法

所有样品采集完毕后联系北京微生太科技有限公司取样。微生太将派送干冰到样品所在地，将样品放进派送干冰的泡沫盒，封严后交给物流师傅既可。

五、参考文献

1. Association of the Vaginal Microbiota with Human Papillomavirus Infection in a Korean Twin Cohort, 2013, Plos one.

2. Pregnancy’s Stronghold on the Vaginal Microbiome, 2013, Plos one.

3. Temporal Dynamics of the Human Vaginal Microbiota, 2012, Sci Transl Med.

4. Vaginal microbiome of reproductive-age women, 2010, PNAS.

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